OOCYTA TRANSZPLANTÁCIÓ, ÉS MIKROMANIPULÁCIÓ ZEBRADÁNIÓ (DANIO RERIO) OOCYTÁKON
Csenki Zsolt1, Andreas Zaucker2,3, Kovács Balázs4, Lefler Kinga Katalin1, Hegyi Árpád1, Müller Tamás1, Kovács Róbert1, Yavor Hadzhiev2,3, Urbányi Béla1, Müller Ferenc2,3, Váradi László1
1Szent István Egyetem, Mezőgazdaság- és Környezettudományi Kar, Környezet- és Tájgazdálkodási Intézet, Halgazdálkodási Tanszék, Gödöllő
2Institute of Toxicology and Genetics Forschungszentrum, Karlsruhe
3Department of Medical and Molecular Genetics Division of Reproductive and Child Health Institute of Biomedical Research, University of Birmingham, Birmingham
4Szent István Egyetem, Környezetipari Regionális Egyetemi Tudásközpont, Gödöllő
Kivonat
Az emlősöknél széleskörűen elterjedt és hatékony petesejt manipulációs módszerek (transzgén injektálás, mélyhűtéses tárolás) a halikrákon az ikra magas sziktartalma és vastag ikrahéj nem, vagy nehezen alkalmazhatók. Új lehetőségeket nyújthatnak a korai fejlődési állapotú oocytákon végezhető módszerek. Sikeres oocyta transzplantáció alkalmazásával, kiküszöbölhetők az ikrák felépítéséből adódó hiányosságok, könnyen vizsgálhatóak lehetnek az oocytában illetve az ikrában lezajló folyamatok, az anyai hatások.
Eddigi vizsgálatink során már sikerült egyértelműen bizonyítanunk, hogy a bejuttatott oocyták beépülnek a recipiens petefészekbe, és ott életben maradnak, egy részük tovább is fejlődik.
A mostani kísérleteink célkitűzése ezért az volt, hogy fiatal fejlődési állapotú (szikfelhalmozás előtti, de még jól látható sejtmaggal rendelkező) oocyták "nevelő"-anyába juttatása után, nyerhető-e termékenyítésre alkalmas ikra, illetve lehetséges-e mikroinjektálni az oocytákat, valamint a különböző bejuttatott nukleinsavak (DNS, mRNS, siRNS) működnek-e az oocytában.
Vizsgálataink során zebradánió (Danio rerio) fajon végeztünk intraspecifikus átültetéseket. Eddigi vizsgálataink is ezen a halfajon történtek, mert viszonylag rövid idő alatt ivaréretté válnak az egyedek, az ivarsejtek fejlődése gyors. Egy alkalommal átlagosan 100 db szikfelhalmozódás előtti oocytát transzplantáltunk a nevelőanyákba. Az átültetések nyomonkövetésére markerként transzgenikus (β-aktin YFP jelölésű) zebradánió oocytákat használtunk. A transzplantált anyákat hetenként szaporítottuk, majd fluoreszceins mikroszkóp alatt vizsgáltuk az embriókat, a termékenyülés utáni második napon.
A mikromanipulációhoz II-III-as típusú oocytákat használtunk. Az injektálás után az oocytákat nevelő anyákba ültettük, majd a következő napon fluoreszceins mikroszkóp alatt vizsgáltuk a transzplantált petefészket.
A vizsgálataink alapján elmondható, hogy a transzplantált oocytákból nyerhető termékenyítésre alkalmas ikra (az összes transzplantált oocyta 0,07%-a), illetve életképes embrió. Az oocyták mikroinjektálással manipulálhatóak, a bejuttatott nukleinsavak működnek a kezelt oocytákban.
Programajánló
Hírek
Tisztelt Látogatók!
A hazai agrár-felsőoktatás szükséges megújulásának mérföldköve az alapítványi fenntartású Magyar Agrár- és Élettudományi Egyetem (MATE) létrejötte, amely 2021. február 1-től 5 campuson, több mint 13 ezer hallgató számára fogja össze a dunántúli és közép-magyarországi élettudományi és kapcsolódó képzéseket. Az intézményhez csatlakozik a Nemzeti Agrárkutatási és Innovációs Központ (NAIK) 11 kutatóintézete is, így az új intézmény nem csupán egy oktatási intézmény lesz, hanem az ágazat szellemi, szakpolitikai és innovációs központjává válik, amely nagyobb mozgásteret biztosít a képzések, a gazdálkodás és szervezet modernizálásához, fejlesztéséhez. Az összeolvadással magasabb fokozatra kapcsolunk, a kutatói és egyetemi szféra szorosabban fonódik majd össze, aminek következtében még több érdekes, izgalmas kutatás-fejlesztés születhet majd az agrárium területén.
Kérjük, kövesse tevékenységünket a jövőben is a www.uni-mate.hu honlapon!
A szokásostól eltérően az idei évben ősszel, október 03-04 között került megrendezésre az Ultrabalaton csapatversenye. NAIK-os csapat az idei évben állt először rajthoz a 14. alkalommal kiírt versenyen.